Исследовательский проект “Исследование формирования острого иммунного ответа и тренированного иммунитета в ответ на введение рекомбинантной БЦЖ, продуцирующей цитокин Gmcsf”

Цель – Получить рекомбинантный штамм БЦЖ, продуцирующий цитокин Gmcsf, и охарактеризовать его способность формировать тренированный иммунитет в эксперименте на животных.

Актуальность. Традиционные вакцины обеспечивают специфическую защиту, однако феномен тренированного врожденного иммунитета (напр. у вакцины БЦЖ) открывает перспективы создания «превентивных» вакцин против новых патогенов. Усиление и пролонгация неспецифической защиты может стать важным инструментом профилактики новых вирусных инфекций.

Гипотеза – генетическая модификация вакцины БЦЖ с включением генов иммуноактиваторов (Gmcsf) усилит и продлит формируемый ею неспецифический тренированный иммунитет.

Задачи:

1. Создать генетические конструкции для экспрессии Gmcsf в БЦЖ, трансформировать микобактерии полученными плазмидами, провести селекцию рекомбинантных штаммов и подтвердить экспрессию с помощью ПЦР и ИФА.
2. Изучить формирование тренированного иммунитета в экспериментах на животных:
   a) оценить острый иммунный ответ на введение БЦЖ и БЦЖ‑Gmcsf;
   b) исследовать формирование долгосрочного врожденного тренированного иммунитета.

Объект исследования – Тренированный иммунитет и острый иммунный ответ.

Предмет исследования – Рекомбинантная вакцина БЦЖ, продуцирующая цитокин Gmcsf.

Основные результаты:

• Липополисахарид (ЛПС) индуцировал экспрессию генов раннего иммунного ответа.
• Наиболее выраженная активация генов раннего иммунного ответа по сравнению с контролем наблюдалась в группе животных, получивших низкую дозу БЦЖ‑Gmcsf.
• Предполагается, что высокие дозы БЦЖ и БЦЖ‑Gmcsf, вызвавшие сильный острый иммунный ответ на 3‑и сутки, привели к иммунному истощению и не способствовали формированию тренированного иммунитета.

Вывод:
Модификация БЦЖ с экспрессией Gmcsf и правильный подбор дозы потенциально позволяют усилить тренированный врожденный иммунитет, что делает такой подход перспективным для разработки вакцин широкого спектра действия.